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實(shí)了個(gè)驗(yàn)彩色預(yù)染蛋白Marker
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彩色預(yù)染蛋白Marker(10-200 kDa,30 µL)是一種專為蛋白質(zhì)電泳設(shè)計(jì)的重要工具,它由一系列已知分子量的蛋白質(zhì)組成,這些蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)染色處理,能夠在電泳過(guò)程中直接顯示出可見(jiàn)的彩色條帶。彩色預(yù)染蛋白Marker不僅在電泳實(shí)驗(yàn)中用于估算樣品蛋白質(zhì)的分子量,還在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中提供了重要的視覺(jué)參考,幫助研究人員實(shí)時(shí)監(jiān)控電泳進(jìn)展和結(jié)果分析。以下是對(duì)這種產(chǎn)品的詳細(xì)介紹。
彩色預(yù)染蛋白Marker是一種混合蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,這些蛋白質(zhì)被染色成不同的顏色,使其在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)過(guò)程中可以直接觀察到。它涵蓋了10-200 kDa的分子量范圍,適合大多數(shù)常見(jiàn)蛋白質(zhì)的分子量估算和分析。30 µL的小包裝設(shè)計(jì)足夠滿足多次實(shí)驗(yàn)使用,同時(shí)減少了試劑浪費(fèi)。
彩色預(yù)染蛋白Marker通常由多個(gè)已知分子量的蛋白質(zhì)組成,這些蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)特殊處理并染成不同顏色。常見(jiàn)的蛋白質(zhì)Marker通常包括:
10 kDa
15 kDa
25 kDa
35 kDa
50 kDa
70 kDa
100 kDa
150 kDa
200 kDa
這些蛋白質(zhì)的顏色各異,使得研究人員能夠在電泳過(guò)程中直接觀察到不同分子量的蛋白質(zhì)條帶,并根據(jù)條帶的遷移距離進(jìn)行樣品蛋白質(zhì)的分子量估算。
分子量標(biāo)準(zhǔn):彩色預(yù)染蛋白Marker提供了多個(gè)已知分子量的蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn),研究人員可以通過(guò)比較樣品蛋白質(zhì)與Marker的遷移距離,快速估算樣品的分子量。
電泳進(jìn)度監(jiān)控:在電泳過(guò)程中,Marker中的彩色條帶隨著電場(chǎng)遷移,使研究人員可以實(shí)時(shí)觀察電泳的進(jìn)展,判斷何時(shí)結(jié)束電泳以獲得最佳分離效果。
轉(zhuǎn)膜效能驗(yàn)證:在Western blot實(shí)驗(yàn)中,彩色預(yù)染Marker還可以用于驗(yàn)證蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上的效率。預(yù)染的顏色可以直接在膜上觀察到,確保轉(zhuǎn)膜步驟的成功。
彩色預(yù)染蛋白Marker是SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)準(zhǔn)工具。通過(guò)提供一系列已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白,Marker幫助研究人員估算樣品蛋白質(zhì)的分子量,從而分析蛋白質(zhì)的大小、純度或表達(dá)水平。
在Western blot分析中,彩色預(yù)染蛋白Marker起到雙重作用:首先,它作為分子量標(biāo)準(zhǔn),幫助確定樣品蛋白質(zhì)的分子量;其次,Marker中的彩色條帶在轉(zhuǎn)膜后仍然可見(jiàn),因此可以用于評(píng)估轉(zhuǎn)膜的成功率,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
在開(kāi)發(fā)新的電泳方法或優(yōu)化現(xiàn)有電泳條件時(shí),彩色預(yù)染蛋白Marker可以用于校準(zhǔn)電泳系統(tǒng),確保分離效果的穩(wěn)定性和重復(fù)性。此外,通過(guò)觀察Marker條帶的遷移情況,研究人員可以判斷電泳緩沖液、凝膠濃度等參數(shù)是否適當(dāng),從而優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。
使用彩色預(yù)染蛋白Marker進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)的步驟如下:
樣品準(zhǔn)備:在電泳開(kāi)始前,將Marker溶液輕輕混勻,確保Marker中的各蛋白組分均勻分布。每次使用時(shí),通常取1-2 µL的Marker直接加到樣品槽中。建議Marker的用量視凝膠孔尺寸和實(shí)驗(yàn)需求而定。
電泳運(yùn)行:在蛋白樣品加樣完畢后,按照標(biāo)準(zhǔn)SDS-PAGE操作進(jìn)行電泳。Marker的彩色條帶會(huì)隨著電泳的進(jìn)行逐漸遷移,研究人員可以通過(guò)觀察這些條帶來(lái)監(jiān)控電泳進(jìn)展。
電泳結(jié)束:當(dāng)Marker中的目標(biāo)條帶(通常是中等分子量條帶)到達(dá)凝膠的下方時(shí),可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求決定是否結(jié)束電泳。此時(shí),樣品中的蛋白質(zhì)應(yīng)該已經(jīng)得到良好的分離。
蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)膜(如果需要):對(duì)于Western blot分析,將電泳后的凝膠與膜進(jìn)行轉(zhuǎn)移。Marker條帶在膜上的可視性使得研究人員能夠確認(rèn)轉(zhuǎn)膜是否成功,并為后續(xù)的抗體檢測(cè)提供參考。
結(jié)果分析:電泳結(jié)束或轉(zhuǎn)膜后,直接觀察Marker條帶的位置,通過(guò)對(duì)比這些條帶的位置與樣品蛋白質(zhì)的遷移情況,估算樣品蛋白質(zhì)的分子量。
彩色預(yù)染蛋白Marker的一個(gè)顯著優(yōu)勢(shì)是其直接可視化能力。與傳統(tǒng)的非染色Marker相比,彩色預(yù)染Marker在電泳和轉(zhuǎn)膜過(guò)程中都能被直接觀察,減少了實(shí)驗(yàn)步驟,提高了效率。
Marker覆蓋了從10 kDa到200 kDa的分子量范圍,適用于大多數(shù)常見(jiàn)的蛋白質(zhì)分離和分析實(shí)驗(yàn)。這種廣泛的分子量覆蓋范圍確保了Marker的通用性,適用于多種不同的研究需求。
Marker中的各個(gè)蛋白質(zhì)組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理,能夠在多種電泳條件下表現(xiàn)出穩(wěn)定的遷移行為,條帶清晰、分辨率高。同時(shí),Marker具有較高的靈敏度,即使在低濃度下也能提供可靠的分子量參考。
30 µL的小包裝設(shè)計(jì)適合實(shí)驗(yàn)室的日常使用,既滿足了多次實(shí)驗(yàn)的需求,又減少了試劑的浪費(fèi)和儲(chǔ)存空間的占用。這種設(shè)計(jì)非常適合小型實(shí)驗(yàn)室或?qū)τ贛arker使用量較小的科研項(xiàng)目。
混勻操作:在使用前,務(wù)必輕輕混勻Marker溶液,避免蛋白質(zhì)沉淀影響條帶的清晰度和準(zhǔn)確性。
存儲(chǔ)條件:Marker應(yīng)存放在-20°C冰箱中,以確保其穩(wěn)定性和有效性。避免反復(fù)凍融,以防蛋白質(zhì)降解或活性喪失。
樣品加樣:每次使用時(shí),建議用微量移液器準(zhǔn)確量取Marker,以確保樣品間的一致性和電泳結(jié)果的可比性。
使用量控制:過(guò)量或不足量的Marker使用可能導(dǎo)致電泳結(jié)果不佳。建議根據(jù)凝膠孔的大小和樣品量適當(dāng)調(diào)整Marker的使用量。
在癌癥研究中,彩色預(yù)染蛋白Marker常用于分析腫瘤細(xì)胞中不同蛋白質(zhì)的表達(dá)情況。例如,研究人員通過(guò)SDS-PAGE分離腫瘤細(xì)胞提取液中的蛋白質(zhì),并通過(guò)與Marker比較,確定特定蛋白質(zhì)的分子量。這些數(shù)據(jù)對(duì)于理解腫瘤發(fā)生機(jī)制和開(kāi)發(fā)新的治療靶點(diǎn)具有重要意義。
在蛋白質(zhì)工程中,Marker用于驗(yàn)證重組蛋白的表達(dá)和純化效果。通過(guò)SDS-PAGE和Western blot,研究人員可以快速評(píng)估重組蛋白的分子量是否符合預(yù)期,從而指導(dǎo)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和工藝優(yōu)化。
彩色預(yù)染蛋白Marker(10-200 kDa,30 µL)是一種高效、便捷的實(shí)驗(yàn)工具,為蛋白質(zhì)電泳分析提供了可靠的分子量參考和可視化監(jiān)控手段。其廣泛的應(yīng)用范圍、穩(wěn)定的性能以及直接可視化的優(yōu)勢(shì),使其成為實(shí)驗(yàn)室蛋白質(zhì)研究中的工具。無(wú)論是在基礎(chǔ)科研還是應(yīng)用開(kāi)發(fā)中,該Marker都展現(xiàn)出了性能,為蛋白質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)提供了強(qiáng)有力的支持。